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免疫检验 抗血清纯化技术

时间:2012-10-24 10:18来源:临床医学检验技术考试 作者:lengke 点击:
  

纯化的目的是尽量去除抗血清中与目的抗体不相关的成分,防止与特定抗原反应时起干扰作用。最常见的纯化方式是提取特异性IgG或单价特异性抗血清。

一、特异性IgG抗血清制备

首先用硫酸铵或硫酸钠盐析法粗提丙种球蛋白,再进一步纯化,常用的方法有:

1.离子交换层析法:离子交换剂有DEAE纤维素和QAE纤维素。

2.凝胶过滤:通过多孔凝胶介质达到分离目的。

3.亲和层析法:采用纯化抗原或粗提抗原交联的sepharose 4B的层析柱来制备。

4.酶解法:片段用胃蛋白酶水解制备。

二、单价特异性抗血清制备

主要通过亲和层析法(交叉杂抗原与琼脂糖珠4B交联制成层析柱)和吸附法(用双功能试剂与抗原交联,制成固相吸附剂)除去杂抗体。

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