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2010年检验技师资格考试试题——基础理论知识(14)

时间:2010-02-23 17:18来源:临床医学检验技术考试 作者:lengke 点击:
  

201、试述过氧化酶染色的原理、结果观察和临床意义

  白细胞内含有过氧化酶,过氧化酶能分解过氧化氢释出新生态氧,使联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,再与亚硝基铁氰化钠作用生成蓝黑色颗粒沉着于细胞内。

  结果观察:阳性反应呈蓝色至棕蓝色颗粒,定位于胞浆中,胞核呈阴性反应。操作中血片应新鲜,超过24厂则不宜染色,因过氧化酶易消失,另外染料不能过于陈旧,过氧化氢的浓度要适当,最好临用时配制。

  过氧化酶染色用于白血病的鉴别诊断。在粒细胞系统中,原始粒细胞早期为阴性反应,晚期为阳性反应,自早幼粒细胞起为阳性反应,随细胞成熟反应逐渐增强。幼单核细胞及成熟单核细胞过氧化酶染色为弱阳性反应,颗粒细小,弥散分布,且常盖在核上。淋巴细胞系无论是原始或成熟阶段,过氧化酶染色都为阴性反应。

  202、使用显微镜的禁止事项是什么?

  (1)切忌用酒精擦拭物镜和目镜的透镜。

  (2)切忌将物镜浸于甲苯或酒精中(可使透镜的粘着变松)。

  (3)切忌使用普通纸或棉花擦拭透镜。

  (4)切忌用手指接触物镜。

  (1)切忌用甲苯擦拭文台或载物合。

  (2)切忌用布或纸擦拭目镜和物镜内部的透镜(因其可使抗反光层剥脱);只能用细画笔擦刷。

  (7)切忌卸掉显微镜的目镜,除非出现目镜开口处滞住不动的情况。

  (8)在气候湿热的国家里,切忌把显微镜置于密闭的木盒内。

  (9)物镜上尚带有浸油时,切不可将显微镜放在一旁不管。

  (10)切忌用1只手拿显微镜的臂,要用双手操作;一只手托住底座,另1只手握住镜臂。

  203、使用显微镜的油浸物镜时,须在被检物与物镜间滴加香柏油,其理由何在?

  显微镜的分辨力的大小,物镜是主要的,而物镜的分辨力,则取决于光波波长和数值孔径。

  用干燥镜观察物体时,在物镜与标本之间不加任何液体介质。而使用油镜时,则须在盖玻片与物镜间,滴加香柏油作媒质,以提高显微镜分辨率。这是因为显微镜的分辨本领是由其数值孔径决定的,而后者与媒质的折射率成正比,折射率越大,数值孔径越大,反之亦然。由于香柏油的折射率大(1.52)、水次之(1.33)、空气最小(1.0),故在镜口角相同时,油浸物镜滴加香柏油后,其数值孔径可由空气的0.82,水的1.09,增加到香柏油的1.25.从而提高显微镜的分辨本领,同时也增加了像场的亮度

  204、怎样才能提高比色分析的灵敏度和准确性?

  除注意电压应稳,光源充足、光电池是好的之外,主要掌握如下几点:

  (1)选择适当的滤光片或波长,按各方法要求选取。

  (2)比色计的灵敏度,在0.2~0.6范围之内,过低过高都不够准确。故被测物质颜色(浓度)应在或调节在此范围内测定之。

  (3)比色杯最好是原配的,空白时透光率应相同,装溶液比色时才会准确。另外装好比色标本液的比色杯,其位置(放比色槽)每次的前后均应一致。

  (4)准确掌握比色时间;一般显色反应开始时,颜色逐渐加深,经一定时间,颜色达最高点,当稳定4段时间后,开始消褪等。应于稳定阶段对比色。

  (5)测定时如试剂本身有颜色或有干扰性杂质,都应做空白管,以减少其对结果的影响。

  205、电动离心机容易发生故障的部位,怎样维修?

  电动离心机容易发生故障的部位是:①电刷长期与电动机高速旋转的转子的整流子接触,容易磨损,经常检查和调整电刷的推进螺针,以保持电刷与整流子的良好接触,若电刷严重磨损后使与整流子脱离接触,使电流无法通入转子绕阻,需要换同规格的新电刷;若无新电刷,也可用废电池上的炭棒自制,但这种炭刷含金属成份少,故磨损较快,不耐用,只能解决短期的需要。②电刷磨损后产生的灰尘沾附在电动机转子上,长期使用后,便形成1层薄导电层,便整流子转子铁芯导通,引起机壳带电,所以每隔半年至一年应将电动机上的电刷炭粉清除干净。

  206、解释分子病的概念,并举例加以说明。

  分子病的概念:由于DNA分子的遗传缺陷,致使蛋白分子中氨基酸残基的变异所引起的疾病称为分子病。例如正常人血红蛋白β亚基的第6位氨基酸残基是谷氨酸,而镰刀形红细胞性贫血患者的血红蛋白中,谷氨酸被缬氨酸取代,仅此一个氨基酸之差,本来是水溶性的血红蛋白,就变成溶解度降低,相互粘着,聚集成丝,导致红细胞变成镰刀状而极易破碎,产生贫血。这种单个氨基酸的替代,是一个错义突变(点突变),即编码谷氨酸的密码子GAA颠换成了GUA.

  某些由于某种蛋白质缺乏的疾病也被称为分子病,例如葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的蚕豆病、低密度脂蛋白受体缺乏的家族性高胆固醇血症、磷酸核糖焦磷酸合成酶缺乏的痛风症和酪氨酸酶缺乏的白化病等等。

  207、解释DNA的变性、复性和核酸的分子杂交?

  (1)DNA分子是由两条头尾倒置的脱氧多核苷酸所组成,其中一条链的碱基与另一条链碱基之间有氢键连接,并以A-T、G-C互补,整个DNA分子呈双螺旋结构。在加热、碱性等条件下,链间氢键断裂,形成两条单链结构,此种现象称为DNA变性。

  (2)在去除变性因素后,两条变性的碱基互补的单链DNA可以回复成双链结构,恢复原有的物理化学性质和生物活性,这种现象称为DNA复性。

  (3)热变性的DNA在缓慢冷却过程中,具有碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象称为核酸分子杂交。DNA与DNA及RNA与DNA间的分子杂交在核酸研究中有十分广泛的用途。

  208、什么是酮体?为什么在糖尿病酮症酸中毒时测定β—羟丁酸是首要的选择?

  (1)乙酰乙酸、β—羟丁酸和丙酮三者统称为酮体。酮体是脂肪酸在肝脏内进行β—氧化的中间产物。乙酰乙酸可被还原生成β—羟丁酸,部分乙酰乙酸可脱羧生成丙酮。由于酮体中乙酰乙酸和β—羟丁酸是较强的有机酸,在未控制的糖尿病人,脂动员过强,酮体生成大于肝外组织利用酮体的能力,将产生酮症酸中毒。

  (2)酮症酸中毒时首选测定β—羟丁酸有以下优点:

  ①β—羟丁酸是血中酮体的主体成分(占78%),可反映血中酮体积聚的情况;

  ②酮症酸中毒时,β—羟丁酸水平增高远大于乙酰乙酸和丙酮,故是酮症酸中毒更敏感的一个指标;

  ③β—羟丁酸在酮体中最为稳定(4℃可稳定4d),而丙酮和乙酰乙酸不稳定,如测后两项指标但不及时,会产生较大的误差;

  ④酶法测β—羟丁酸方法特异灵敏、准确性高。

  209、什么是胆固醇的逆向转运途径?试述其简要过程和重要生理意义?

  (1)HDL在LCAT及APOAⅠ、APOAⅡ及LTP等的作用下,将胆固醇从肝外组织转运到肝脏进行代谢转化的过程,称为胆固醇的逆向运转。

  (2)胆固醇逆向转运包括三个过程:

  ①肝脏新合成的HDL加入血液循环后,从肝外组织细胞获取胆固醇;

  ②血浆中的卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT,APOAⅠ是它的激活剂)将HDL摄取的游离胆固醇酯化成酯,使HDL逐步膨胀成为成熟的HDL,经血液运输至肝脏。

  ③肝细胞表面的HDL受体结合成熟HDL,被肝细胞摄取降解,其中的胆固醇酯可被分解转化成胆汁酸排出体外。完成胆固醇的逆向转运。

  (3)机体通过这种机制,将外周组织衰老细胞膜中的胆固醇转运回肝脏代谢并排出体外,使细胞内胆固醇维持稳态,限制AS的发生发展。

  210、什么是DNA的半保留复制?并解释DNA复制的半不连续性?

  (1)DNA复制最重要的特征是半保留复制。复制时,母链的双链DNA解开成两股单链,各自作为模板指导子代合成新的互补链。子代细胞的DNA双链,其中一股单链从亲代DNA分子中完整地接受过来,另一股单链则完全重新合成。由于碱基互补,两个子细胞的DNA双链,都和亲代DNA碱基序列完全一致。这种复制方式称为半保留复制。

  DNA半保留复制是1958年由M.Messelson和F.W.Stahl用15N标记技术证实的。其后许多实验都证实,不论原核生物还是真核生物,其DNA的复制全是半保留复制。

  (2)DNA复制只能按5′→3′一个方向合成新生链。以复制叉移动方向作标准,解开的两股链中只有一股链可连续合成,就是领头链,另一股链只能解开至相当长度后,才开始引物延长复制,即产生多个岗奇片断,并由后者连接成随从链。由于岗奇片断的合成是不连续的,故DNA的复制是半不连续的。

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