1.甲醇或乙醇提取
常用不同浓度的乙醇或甲醇提取,如果皂苷分子中羟基、羧基等极性基团较多,亲水性较强,用稀醇提取效果较好。
提取液减压浓缩后,加适量的水,必要时先用乙醚、石油醚等亲脂性溶剂萃取,除去亲脂性杂质,然后用水饱和正丁醇萃取,减压蒸干,得粗制总皂苷,此法被认为是皂苷类成分提取的通法。
如人参总皂苷的提取。
2.甲醇或乙醇提取-丙酮或乙醚沉淀法
由于皂苷在甲醇或乙醇中溶解度大,在丙酮、乙醚中的溶解度小,因此将醇提取液适当浓缩后,加入丙酮或乙醚,皂苷可能被沉淀析出。
3.碱水提取法
对于一些酸性皂苷,可先用碱水提取,再加酸酸化使皂苷沉淀析出。如槲寄生中土当归酸的提取。
4.皂苷的色谱分离
(1)吸附色谱法
硅胶、氧化铝——正相
反相硅胶——反相
洗脱剂:混合溶剂
(2)分配色谱法
支持剂:硅胶、氧化铝
洗脱溶剂:不同比例的氯仿-甲醇-水系统
(3)高效液相色谱法
反相柱,用甲醇-水或乙晴-水洗脱,分离皂苷
(4)大孔树脂色谱
水洗去糖等水溶性杂质,10-30%醇洗下极性大的皂苷(含糖多),50%以上醇洗下极性小的皂苷(含糖少)。
(5)Sephadex LH-20凝胶色谱
分子量大的先洗下来,分子量小的后洗下来。
(6)其它方法
分段沉淀法:醇中加乙醚或丙酮
铅盐沉淀法:中性醋酸铅沉淀酸性皂苷,碱性醋酸铅沉淀中性皂苷
胆甾醇沉淀法:粗总皂苷乙醇液+胆甾醇乙醇液沉淀(水、醇、乙醚洗),加乙醚回流,胆甾醇溶于乙醚,剩下的残渣为三萜皂苷。