133.何为凝集试验、直接凝集试验?
凝集试验:在颗粒性抗原(如细菌、红细胞)悬液中,加入含有特异性抗体的血清,在一定浓度电解质参加下,颗粒凝集成团,叫做凝集试验。
直接凝集试验:有玻片法及试管法2种。
玻片法:是一种定性试验,其操作方法是将已知诊断血清与待检抗原在玻片上混合,而后不断摇动玻片1~2min,如出现肉眼可见的凝集颗粒,即为阳性。
试管法:是一种定量试验,其操作是将待检血清在试管中用生理盐水做对倍稀释,而后加入等量的已知抗原,若抗原抗体有特异关系时即可出现凝集现象,并以出现明显凝集的血清最高稀释倍数,为该血清效价(滴度)。
134、直接凝集试验用途有哪些?
直接凝集试验的用途有:
(1)测定抗原:用已知诊断血清来检查细菌域血型。
(2)测定抗体:用已知抗原检查患者血清中有无相应抗体,以诊断传染病,如肥达氏反应。
135、。何请免疫活性细胞的表面抗原和表面受体?
表面抗原:指免疫活性细胞的膜表面具有同种抗原,如小白鼠的O抗原存在于胸腺细胞及外周血T细胞表面,也少量存在于脑组织细胞表面。
表面受体:即在细胞膜表面存在着与抗原决定簇发生结合反应的受体,如人的T细胞具有与绵羊红细胞结合的受体,两者结合后呈花环状。人和小白鼠的B细胞具有C,结合的受体,以及与IgG抗体FC片段结合的FC受体。借此可作红细胞-抗体-补体(EAC)花环形成反应,以同T细胞相区别。
136.什么是T淋巴细胞?
T淋巴细胞:即胸腺依赖的淋巴细胞是由小淋巴细胞进入胸腺内受到胸腺素作用后分化而成(小淋巴细胞在胸腺外受胸腺激素作用后,也可成为T淋巴细胞)。这类细胞寿命较长(生存4~5年以上),能在体外与绵羊红细胞结合形成自然玫瑰花形,受到抗原刺激后5d左右即转化成为淋巴母细胞,迸而发展成“致敏的淋巴细胞”再遇抗原时即释放出免疫效应因子,发挥细胞免疫力作用。据文献报导,T细胞至少有5个亚群,但各人分类命名很不统一。
137、什么是K细胞?
K细胞:近年来发现除T、B细胞外,还有两群具有杀伤靶细胞能力的淋巴细胞:即K细胞和NK细胞。
1)K细胞:叉称依赖抗体的细胞毒细胞ADCC是一种淋巴细胞,它来源于骨髓干细胞,但不受胸腺或腔上囊类淋巴细胞组织的影响,且其免疫作用本身无特异性,但K细胞具有IgG的FC受体,当特异抗体(IgG)与靶细胞结合后,此抗体FC段活化,K细胞的FC受体即可与之结合,从而杀伤靶细胞。在排斥同种异体移植物,破坏恶性肿瘤以及溶解被病毒感染的宿主细胞中都起着重要的作用。
(2)NK细胞(又称天然杀伤性细胞):有人认为此群细胞即K细胞,但也有人认为是另一群淋巴细胞,此群细胞直接作用于靶细胞不需抗体和补体参加,此细胞有C3受体,但也有FC受体。
138、试述酶标免疫吸附测定(ELISA)原理
酶免疫试验的原理是使酶与已知抗原(或抗体)结合,用以检测血清中的抗体(或抗原)。由于酶与抗原(或抗体)结合后并不改变该抗原(或抗体)的免疫学反应的特异性,故仍可与待检血清中的相应抗体(或抗原)相结合,同时也不影响酶本身的酶学活性,故可加上相应的酶底物使之显色而进行定性或定量检查。ELISA为酶免疫试验的一种,乃利用聚苯乙烯等试管或微量滴定板的吸附作用,便整个试验过程在该管(或板)中进行。例如,可将已知抗原(或抗体)加入聚苯乙烯管(或板)中,使之吸附于其表面而不被洗掉,再加待检血清,如待检血清中有相应抗体(或抗原),则与之结合而被吸附,故亦不易被洗掉,然后再加上用酶标记的抗人lgG的抗体(或酶标记的相应抗体),义与之结合而被吸附,亦故不易被洗掉,最后加上相应的酶底物使之显色。根据颜色深浅进行定性或定量。本法非常灵敏。只要能制备合适的抗原,均可用以测定抗体,其适用范围同间接凝集反应。同样,本法亦可用以检测抗原。
139试述放射免疫测定(RIA)原理
其原理是用放射性同位素对已知的抗原(或抗体)进行标识,然后与待检血清(可能含有相应抗体或抗原)进行反应,再将游离的和已结合的同位素物质进行分离,分别计数,即可算出待检血清中抗体(或抗原)的含量。本法非常灵敏。可用于检测各种抗原,亦可用于检测各种抗体,其适用范围同间接凝集反应。
140.乳胶妊娠试验注意事项有哪些?
(1)试验前将试剂放室温,使操作时温度接近于室温,否则会出现假阳性。
(2)观察结果时间,应根据操作时温度来定,当室温在20C以上,加入乳胶抗原后2~3min;室温在l5C~2O°C可延长到3min左有,室温在10~15°C可延长至4min,一般m性结果可保持lOmin不变。
(3)尿液标本要澄清,否则需先离心或过滤之;以免出现假阴性。
(4)尿液、抗血清,乳胶抗原3者大小应一致,且次序不可颠倒。
(5)尿液比重应在L010以上,否则出现假阳性。
(6)尿液中蛋白++以上,应除去,否则可出现假阳性(可将尿液煮沸2~3min除去之),若尿液中混有精液;因其是高分子蛋白,也可能出现假阳性。
(7)不同批号的乳胶抗原或抗血清不能配对使用,因其效价各有不同。