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生化检验 DNA片断原位标记法

时间:2012-01-05 14:39来源:临床医学检验技术考试 作者:sunhong13 点击:
  

  凋亡细胞DNA片断原位末端检测技术是指在细胞(或组织)结构保持不变的情况下,用荧光素、地高辛或生物素标记的脱氧尿三磷酸(DUTP)和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)相反应与凋亡细胞裂解后3的羟基(-OH)端结合,经显色反应后检测DNA裂解点的技术。

  DNA片段原位标记法有二种:

  1、原位缺口转移(ISNT)技术,它是利用DNA多聚酶I将标记的核苷酸连接到断裂DNA的3-OH端。

  2、原位缺口末端标记技术(ISEL),即TUNEL法,它是利用TdT将标记的DUPT接到3-OH端。研究证明,TUNEL法的敏感性远高于ISNT,尤其对早期凋亡的检测,TUNEL为合适。

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