(一)检测原理
网织红细胞(Ret,RET)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,属于尚未完全成熟的红细胞,其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经活体染色(新亚甲蓝、灿烂甲酚兰(煌焦油蓝)、中性红等染料)后,形成核酸与碱性染料复合物,呈深染的颗粒状或网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞,即为网织红细胞。
1、普通光学显微镜法:在显微镜下计数1000个红细胞中网织红细胞的百分比或分数。
2、网织细胞计数仪法和血液分析仪法:用荧光染料(如吖啶橙、派若宁-Y、噻唑橙)使网织红细胞内RNA着色,用流式细胞术(FCM)得到网织红细胞数。
(二)方法学评价
1、普通光学显微镜法:试管法操作简便、重复性较好。玻片法取血量少、染色时水分易蒸发,造成结果偏低。但显微镜法受主观因素影响较多,且耗时费力。
2、网织细胞计数仪法:可客观地将Ret分成高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)三类,有助于化疗、放疗、移植患者的监测。
3、血液分析仪法:可提供网织红细胞绝对值(Ret)、网织红细胞百分比(Ret%)、网织红细胞分布宽度(RDWr)、网织红细胞平均体积(MCVr/MRV)、网织红细胞血红蛋白浓度(HCr)、网织红细胞平均血红蛋白浓度(MCHCr)、网织红细胞血红蛋白分布宽度(HDWr)、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数(RMI,RMI=(MFR+HFR)/LFR×100)。仪器法优点是测量细胞多、避免主观因素、方法易于标准化。
(三)质量控制
1、显微镜法
影响因素有:操作人员对网织红细胞识别不同、血涂片质量好坏、计数红细胞数量多少、计数方法等。Miller窥盘法计数网织红细胞误差可减小,网织红细胞95%可信限为:
2、仪器法:仪器法计数红细胞10000~50000个。出现Howell-Jolly小体、有核红细胞、巨大血小板会使结果假性增高。
(四)参考值
显微镜计数法:成人0.008~0.02或(25~75)×10 9/L,新生儿0.02~0.06。仪器法:表1-2-5。RMI:男性为9.1%~32.2%,女性为12.8%~33.7%。
(五)临床意义