激光与细胞化学法检测白细胞计数与分类有两种通道。
1)过氧化物酶检测通道
白细胞经过氧化物酶染色后,胞质内显示细胞化学反应。过氧化物酶活性:嗜酸性粒细胞>中性粒细胞>单核细胞,淋巴细胞和嗜碱性粒细胞无过氧化物酶活性,此为血液分析仪白细胞分类的基础。当激光束照射到细胞时,产生不同强度的散射光,以吸光率(酶反应强度)为X轴,光散射(细胞大小)为Y轴,每个细胞根据这两个信号的不同,定位在散点图上。
各类白细胞在散点图上的位置
2)嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道
血液与酸性表面活性剂反应,不仅红细胞溶解,而且除嗜碱性粒细胞外,其他所有白细胞膜均被破坏.胞质溢出,仅剩裸核。当激光束照射到细胞时,产生不同强度的散射光,形成二维细胞图,其中,嗜碱性粒细胞呈高狭角散射,定位于细胞图上部,裸核细胞则位于细胞图下部。
嗜碱性粒细胞和分叶核粒细胞在散点图上位置