可溶性抗原和抗体在半固体琼脂内扩散,进行沉淀反应,称琼脂扩散反应。琼脂扩散可分为单向琼脂扩散和双向琼脂扩散两种类型。
1.单向琼脂扩散——将一定浓度的抗体与半固体琼脂混合,倾注于平皿或玻片上。凝固后,在琼脂层打孔,再将抗原加入孔中,使其向四周扩散,一定时间后在比例适当处形成肉眼可见的环状沉淀线。
该反应也可在试管内进行。
2.双向琼脂扩散——将半固体琼脂倾注于平皿或玻片上。待凝固后,在琼脂上按一定距离打数个孔,然后将抗原与抗体分别注入小孔内,两者互相呈放射状扩散。一定时间后,相应的抗原抗体在浓度最适当的地方出现白色沉淀线。
该反应也可在试管中进行。但要注意的是,半固体琼脂要放在抗体与抗原之间。
琼脂扩散反应和电泳技术结合起来,进一步发展为免疫电泳技术。免疫电泳技术由于具体操作的不同,又可分成许多种方法,如对流免疫电泳、“火箭”免疫电泳、抗原一抗体交叉免疫电泳等。
琼脂扩散反应在实践中应用很广,主要用于抗原抗体成分的研究、生物制品的纯度分析、某些疾病的临床诊断。